La medición de la densidad mineral ósea (DMO) mediante absorciometría de rayos X de energía dual (DXA) predice de manera confiable el riesgo de fractura, pero solo cuando ya se ha perdido una cantidad significativa de hueso.
Investigadores del Grupo INTERFIBIO, Tarragona, España, así como de Austria, la República Checa y los Países Bajos, desarrollaron y validaron un dispositivo portátil genérico que funciona con baterías (Labman Automation, Reino Unido) para detectar SNP asociados a la osteoporosis a partir de una muestra de sangre de selección de dedo, sin necesidad de extracción o purificación de ADN.
Los hallazgos fueron publicados en ACS Central Science.
Los investigadores detectaron polimorfismos de nucleótido único (SNP) vinculados al riesgo de osteoporosis en una gota de sangre, una prueba económica de 15 minutos utilizando un dispositivo electroquímico en investigación.
Las muestras de sangre de 10 μL de 15 personas se diluyeron 1: 5 y se sometieron a termólisis rápida (30 segundos a 95 grados C) para extraer el ADN.
Las muestras de sangre con el ADN lisado y los controles negativos se aplicaron a un dispositivo electroquímico portátil, genérico y en investigación (Labman Automation, Reino Unido), en el que los electrodos de oro individuales se cubrieron con cebadores inversos para cada uno de los cinco SNP asociados a la osteoporosis.
Se identificó ADN en las muestras de sangre que coincidían con los SNP unidos a estos electrodos, la reacción se amplificó con polimerasa recombinasa marcada con ferroceno, lo que facilita la detección electroquímica.
Se detectaron cinco SNP asociados con un mayor riesgo de desarrollar osteoporosis y riesgo de fractura en las 15 muestras de sangre, y los resultados se validaron utilizando ensayos de genotipado de SNP TaqMan y secuenciación de Sanger.
Todo el ensayo, desde la adición de la muestra de sangre termolizada hasta la lectura de los resultados, se completó en solo 15 minutos, con un costo por SNP, a escala de laboratorio, incluido el costo de la matriz de electrodos y todos los reactivos, de 0.3 euros (0.33 USD).
Los investigadores demostraron previamente que el dispositivo identificó un SNP asociado con la resistencia a la rifampicina en Mycobacterium tuberculosis en una muestra de esputo, y un SNP relacionado con la miocardiopatía en la sangre.
La plataforma es completamente genérica y tiene un inmenso potencial para el despliegue en el punto de necesidad en un dispositivo automatizado para el genotipado de SNP dirigido con la única intervención requerida del usuario final que es la adición de muestras.
Los investigadores no informaron ninguna limitación del estudio.